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人乙肝表面抗原試劑盒

 
品牌: 藍(lán)圖
單價(jià): 4500.00元/盒
起訂: 1 盒
供貨總量:
發(fā)貨期限: 自買(mǎi)家付款之日起 天內(nèi)發(fā)貨
所在地: 福建 泉州
有效期至: 2025-03-09
最后更新: 2017-05-25 10:08
瀏覽次數(shù): 2
 
公司基本資料信息

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詳細(xì)說(shuō)明

 

僅供科研使用,不得用于臨床檢驗(yàn)。

 

人乙肝表面抗原(HBsAg定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)說(shuō)明書(shū)

 

【產(chǎn)品名稱(chēng)】

通用名稱(chēng):人乙肝表面抗原(HBsAg定量檢測(cè)試劑盒(ELISA

英文名稱(chēng):Human hepatitis B virus surface antigenHBsAgELISA KIT

 

【包裝規(guī)格】

48人份/盒,96人份/

 

【預(yù)期用途】

僅供科研使用,定量檢測(cè)血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中人乙肝表面抗原(HBsAg的濃度。

 

 

【檢驗(yàn)原理】

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。在預(yù)包被抗人乙肝表面抗原(HBsAg抗體(固相抗體)的微孔酶標(biāo)板中,加入人乙肝表面抗原(HBsAg校準(zhǔn)品和待測(cè)樣本,再加入另一株HRP標(biāo)記的抗人乙肝表面抗原(HBsAg抗體(酶標(biāo)抗體),經(jīng)過(guò)溫育與充分洗滌,去除未結(jié)合的組分,在微孔板固相表面形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體的夾心復(fù)合物。加底物AB,底物在HRP催化下,產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,在終止液(2M 硫酸)作用下,最終轉(zhuǎn)化為黃色,在酶標(biāo)儀上測(cè)定吸光度(OD值),吸光度(OD值)與待測(cè)樣品中人乙肝表面抗原(HBsAg的濃度正相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線,可以計(jì)算出樣本中人乙肝表面抗原(HBsAg的濃度。

 

 

 【主要組成成分】

主要成分

組分

數(shù)量

主要成分

校準(zhǔn)品

0.5ml/*6

抗原配制的6個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品

包被微孔板

96T

預(yù)包被固相抗體

HRP標(biāo)記抗體

6mL

HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體

底物液A

6mL

過(guò)氧化脲工作液

底物液B

6mL

TMB工作液

20×濃縮洗滌液

30mL

0.15%Tween20PBS

說(shuō)明書(shū)

1

--

自封袋

1個(gè)

--

不干膠

2

--

校準(zhǔn)品濃度依次為: 32、168、4、20ng/ml。校準(zhǔn)品已經(jīng)通過(guò)測(cè)試,結(jié)果表明HBs抗原陰性,HIV1、HIV2HCV抗體陰性,由于不存在一種試驗(yàn)方法能夠完全保證沒(méi)有這些物質(zhì),本品必須按照具有潛在的感染性進(jìn)行處理,處理過(guò)程應(yīng)當(dāng)遵循通用的安全措施。

 

需要但未提供的材料及耗材

  1、酶標(biāo)儀

2、精密移液器及一次性吸頭

3、蒸餾水

4、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī)

537℃水浴鍋或恒溫箱

6、500ml量筒

7、無(wú)粉一次性乳膠手套

8、質(zhì)控品(可從藍(lán)圖生物科技產(chǎn)品研發(fā)系統(tǒng)中選擇)

 

【儲(chǔ)存條件及有效期】

  1、2-8℃保存,切勿冷凍,有效期6個(gè)月。

  2、開(kāi)封使用后,包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中,密閉自封袋,并將全部試劑放回2-8℃冰箱。

  3、開(kāi)封后,按照建議的條件保存,校準(zhǔn)品、包被微孔板和HRP標(biāo)記抗體,有效期為14天,其他成分在標(biāo)簽標(biāo)明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。

 

【適用儀器】

 半自動(dòng)的酶標(biāo)儀,如Thermo MK3,或者國(guó)產(chǎn)酶標(biāo)儀。

 

【樣本要求】

 樣本類(lèi)型和采集

以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過(guò)程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。

1、細(xì)胞培養(yǎng)上清:4000rpm條件下離心20min,去除細(xì)胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20以下,避免反復(fù)凍融。

2、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,4000rpm條件下離心20min,小心地分離出血清,保存在- 20以下,避免反復(fù)凍融。

3、血漿:肝素,EDTA,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在4000rpm條件下,離心20分鐘取上清,血漿保存在-20以下,避免反復(fù)凍融。

 

樣本保存和穩(wěn)定性

樣本在2-8條件下,可以?xún)?chǔ)存72h,或者在- 20儲(chǔ)存6個(gè)月。樣本收集后,不是一次檢測(cè)完,請(qǐng)按一次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融,使用時(shí)在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。

 

【檢驗(yàn)方法】

試劑準(zhǔn)備

1、使用前,所有的組分都要至少?gòu)?fù)溫30min,確保充分復(fù)溫到室溫。

2、濃縮洗滌液:從冰箱取出的濃縮洗滌液,會(huì)有結(jié)晶產(chǎn)生,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水,按1:20稀釋?zhuān)?span lang="EN-US" style="color:#000000;font-size:16px;">1份的濃縮洗滌液,添加19份的蒸餾水。

3、底物:底物液AB,在使用前,按1:1體積充分混合,混合后15分鐘內(nèi)使用。

 

操作程序

1、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔。

2、按前面試劑準(zhǔn)備中描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。

3、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。

4、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,樣本孔加待測(cè)樣本50μL,空白孔不加。

5、除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL。

6、用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min

7、揭開(kāi)封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置20s,甩去洗滌液,吸水紙上拍干。

8、如此重復(fù)4次(共洗板5次)。若使用自動(dòng)洗板機(jī),請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高檢測(cè)的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。

9、將底物AB1:1體積充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min。

10、所有孔加入終止液50μL,在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度(OD值)。

 

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

檢測(cè)完成后,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度做為縱坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的吸光度(OD值)作為橫坐標(biāo),利用計(jì)算機(jī)軟件,采用四參數(shù)Logistic曲線擬合(4-pl),創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,通過(guò)樣本的吸光度(OD值),利用方程計(jì)算樣品的濃度值。

如果樣品被稀釋?zhuān)ㄟ^(guò)上述方法測(cè)的的濃度值,要乘以稀釋倍數(shù),才是樣品的最終濃度。

【檢驗(yàn)方法的局限性】

1、僅供科研使用,不得用于臨床診斷。

2、在試劑盒標(biāo)示的有效期內(nèi)使用,過(guò)期產(chǎn)品不得使用。

3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。

4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。

5、如果樣本值高于最高標(biāo)準(zhǔn)品濃度值,請(qǐng)將樣本適當(dāng)稀釋后,再重新測(cè)定。

6、待測(cè)樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果,檢測(cè)前,請(qǐng)排除該因素。

7、通過(guò)其他方法得到的檢測(cè)結(jié)果,與本試劑盒測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性。

 

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

1、物理性能

試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明、無(wú)沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝,無(wú)破損漏氣。

2、劑量反應(yīng)曲線線性

校準(zhǔn)品劑量反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)r值,大于等于0.9900。

3、精密度

批內(nèi)精密度:三組已知的高、中、低濃度樣品,進(jìn)行二十次在同一個(gè)板塊內(nèi)精度評(píng)估。批內(nèi)變異系數(shù)CV%小于10%。

批間精密度:三組已知的高、中、低濃度樣品,進(jìn)行二十次在不同板塊內(nèi)精度評(píng)估。批間變異系數(shù)CV%小于15%

4、靈敏度

最低檢出劑量小于0.1ng/ml。

5、回收率

三組已知的高、中、低濃度樣品,進(jìn)行五次回收率評(píng)估,回收率在85%-115%之間。

6、特異性

本試劑盒識(shí)別天然和重組人乙肝表面抗原(HBsAg,與結(jié)構(gòu)類(lèi)似物無(wú)交叉。

7、穩(wěn)定性

    2℃-8℃保存,有效期6個(gè)月。

 售后電話(huà):13559590085

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